世界卫生组织最新推荐的丙肝与乙肝检测方法

如何检测慢性HBV感染

由于相对成本低，血清学检测目前为检测HBV感染的经典一线检测方法。血清学检测方法主要包括：快速诊断检测法(RDTs)、酶标法(EIAs)、化学发光免疫法(CLIAs)及电化学发光免疫法(ECLs)。病毒核酸检测(NAT)既往主要用于检测病毒的出现以确定是否为活动性的病毒感染以及确定是否有抗病毒应答。

1血清学检测技术

a. 快速诊断检测法

RDT是单次使用的一次性检测，简单易用，通常不需要试剂盒以外的其他试剂。可以在30分钟内从视觉上给出简单的定性结果。由于其简单，成本低和快速性，可以由培训后的人员操作，而不需要静脉穿刺采集标本。正基于此，HBV快速诊断具有快速和简便的特点，非常适合现场献血员开展筛查和其他应急检测，以及基层医疗机构进行常规临床检测，因此即时检测(Point-of-care Testing POCT)对临床检测具有比较重要的意义。 但快速测试通常不适合测试大量血液样本，结果的判定取决于主观判断，不能永久保留原始测试结果记录。

指南认为：贫穷或缺少EIAs基础检测设施的地区，扩大使用有质量保证的RDTs能够帮助扩大HBsAg的检测规模；RDTs也适用于高收入国家，可增加不愿意检测或不能更好的接受医疗保健服务的人群以及制度外的人群中的肝炎检出率；存在的问题是RDTs灵敏度较低，很少有HBsAg RDTs能够满足欧洲联盟提出的分析灵敏度的要求。

b. 基于实验室的免疫分析

大多数基于实验室的血清免疫学测定（EIAs，CLIAs和ECL）是检测抗体、抗原或两者的结合，仅免疫复合物的检测模式稍有不同。通常由制造商确定临界值和结果的有效性，因此EIA结果报告为OD / CO 比值。这些类型的检测法最适合于考虑成本效益且具有高通量样品（每天超过40次）的情况。这些方法是在实验室或由实验室专业人员操作才能进行，因为专业实验室能提供电力，冷库，气候控制室等条件和专业技术人员，并且需要全程低温存储样品和使用精密移液器。这些测定通常仅用于血清或血浆标本，因此需要静脉采血来收集合适的标本。

指南认为：尽管RDTs和EIAs对HBsAg检测的临床灵敏度与特异度相似且可与单一EIA相关标准相符，不同于RDTs的灵敏度相差较大，且一些RDTs具有次优灵敏度；对于HIV感染人群而言，RDTs的临床灵敏度较差（72.3%），但较EIAs而言稍好；EIAs的分析灵敏度较高（高出50-100倍），检测局限性较低的高灵敏度方法的优势在于，能够增加初次感染人群以及HBsAg水平较低的人群的检出率；应用中和步骤的确证试验可合并至实验室水平的EIAs检测；应用于实验室水平的EIAs检测是自动化的，在每天进行大量检测操作的社会环境中是适合而具成本效益性的。

c. 确诊分析检测

对于HBsAg – 化学中和测定法，实验室的免疫测定中，使用中和步骤的同一标本重复测试，确定是否有可观察到抗原反应性。在同一测定中使用特定的含抗HBs的试剂，当与对照组相比，该中和试剂可以因免疫中和反应被消除，可证实为阳性。

2HBV感染的血清学检测策略

a. 应用何种方法

在成人、青少年和儿童（年龄> 12个月）中诊断慢性HBV感染，推荐应用RDT或实验室水平免疫检测形式进行HBsAg检测，该方法能满足质量、安全性和技能标准的最低要求（考虑到分析和临床的敏感性和特异性）。在实验室检测可行且可接受的环境中，推荐将实验室水平免疫检测作为首选分析格式；在实验室检测有限的环境和/或在快速检测联合护理和治疗的人群中推荐使用RDTs以提高检测获得率。

b. 血清学检测策略

指南基于阳性预测值的预估模式结果，根据检测人群不同的血清学流行率，来评价和分析诊断性能，推荐在HBsAg血清流行率≥0.4%的环境或人群中，在进一步评估HBV DNA和肝脏疾病分级前，推荐应用单一血清学方法检测HBsAg；在HBsAg血清流行率＜0.4%的环境或人群中，需要应用两次血清学检测方法检测HBsAg，即应用同一免疫测定中的中和步骤或另一不同的RDT对HBsAg进行检测以证实HBsAg阳性结果。具体检测策略见图1。

策略制定的依据包括：有效地检测方法能够识别大多数可能感染的人群，虽然一种血清学指标检测的阳性预测值比两种血清学指标的检测低，特别是在低患病率的人群中（0.4%、2%），会产生更多的假阳性结果。指南制定小组认为该结果不会产生临床意义，是因为所有的HBsAg阳性患者需要进一步评估肝病分期，及进行HBV DNA检测来评估治疗的需要。指南制定小组指出，在某些特定条件下需6个月后再次检测以确认诊断CHB，这主要是为了区别于急性乙型肝炎。如果第一次使用了高特异性的检测，那么很少需要第二次检测。策略将大大简化检验过程和降低成本，特别是在护理上。

图1 WHO推荐的用于诊断慢性HBV感染的检测策略

（A）HBsAg 血清流行率高于0.4%的单一检测

（B）HBsAg血清流行率低于0.4%的双检测

如何检测HCV现症感染或既往感染

1应用何种方法

指南强烈推荐选择抗体或抗原/抗体作为HCV血清标志物，应用RDT或符合最低质控和安全性标准的实验室基础的免疫检测方法进行成人、青少年和儿童既往或现症感染的检测。对于实验室基础设施及检测条件有限的地区，在需要与后续的治疗护理相结合的人群，推荐使用RDT进行检测。

2血清学检测策略

指南推荐无论人群血清抗体阳性率高低，均应用单一血清学检测方法检测HCV感染，并推荐NAT检测HCV RNA作为确定HCV现症感染的检测方法，HCV核心抗原检测作为替代NAT的备选方法。推荐具体检测策略见图2。

图2 WHO推荐的用于诊断HCV感染的检测策略

指南推荐单一血清学检测策略依据：首先是由于首先选择单一血清学检测随后应用核酸检测来确定HCV现症感染是更符合成本效益的；其次单一血清学检测即具有很高的阳性预测价值，而双血清学检测仅在低患病率的人群（＜0.4%）中对阳性预测值有影响；此外指南推荐存在HCV暴露史者，需进行核酸检测以确定是否存在HCV感染，故单一血清学检测出现假阳性造成的风险是小的。