仓鼠受到 10 的挑战4通过腹膜内(ip)注射NiV-M的PFU。动物(n = 5)每12小时接受300mg / kg / d法匹拉韦口服,感染后立即开始,每天持续两次,直到感染后13天(DPI)。动物在挑战日接受600mg / kg / d的负荷剂量,此后接受300mg / kg / d维持剂量。
在第二个实验中,动物(n = 5)每天接受一次300mg / kg / d法匹拉韦。感染后立即开始给药,负荷剂量为600mg/kg/d,此后维持剂量为300mg/kg/d,直至13 DPI。在每个实验中,仅病毒对照组(n = 4)仅接受相关的载体溶液。
通过每日临床评分确定奄奄一息或体重减轻超过20%的动物被安乐死。通过终末心脏穿刺收集血液,并将组织固定在福尔马林进行免疫组织化学(IHC)研究,或在PBS中匀浆以进行病毒滴度测量,或在TRIzol试剂(Life Technologies,卡尔斯巴德,加利福尼亚州)中匀浆进行qRT-PCR。对幸存者进行监测直至第42天,此时他们被安乐死并收集血清和组织。对于每次操作(病毒感染或药物给药),用异氟醚麻醉动物(Piramal,伯利恒,PA)。
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