法匹拉韦是一种广谱病毒RNA聚合酶抑制剂。它目前被用作2019年冠状病毒病(COVID-19)的可能治疗方法。法匹拉韦的临床前或临床试验需要稳定、灵敏和准确的生物分析方法来定量法匹拉韦水平。最近,有几项关于开发一种经过验证的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法来测量法匹拉韦水平的研究报道。然而,这些方法主要针对血浆样品进行了验证,电喷雾电离仅在阴性或阳性模式下进行,并且这些方法的临床应用尚未应用于COVID-19患者。
法匹拉韦(Favipiravir)是在经过各种测试后才验证的其效果
本研究旨在开发一种经过验证的LC-MS/MS方法,用于测量正负电喷雾电离模式下的法匹拉韦水平,并在接受法匹拉韦的COVID-19患者中进行试点研究,以证明该方法在生物样品中的适用性。使用简单的蛋白质沉淀从所需基质中提取法匹拉韦。使用MS / MS和电喷雾电离源在正负多重反应监测(MRM)模式下定量法匹拉韦水平。在反相Phenomenex C18色谱柱(50 mm × 4.6 mm、5 μm、100 Å)上进行色谱检测,梯度洗脱,使用0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液作为流动相。该方法在0.048–50 μg/mL(负电离模式下)和0.062–50 μg/mL(正电离模式下)的浓度范围内呈线性关系,相关系数(r2) 优于 0.998。总运行时间为3.5分钟。测定内和测定间%CV值分别小于7.2%和8.0%。开发了一种简单、快速和稳健的LC-MS/MS方法,用于法匹拉韦的测量,并进行验证研究。经过验证的方法已成功应用于接受法匹拉韦治疗的 COVID-19 患者的药物水平测量。
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