来那替尼(neratinib)能克服HER2扩增乳腺癌的曲妥珠单抗耐药性

　　曲妥珠单抗已被证明可以改善 HER2 阳性乳腺癌患者的生存结果。然而，很大一部分 HER2 阳性患者对曲妥珠单抗具有固有耐药性或产生耐药性。我们评估了来那替尼（neratinib）（一种不可逆的 panHER 抑制剂）在一组 36 个乳腺癌细胞系中的作用。我们进一步评估了在几种敏感和耐药乳腺癌细胞以及 BT474 异种移植模型中使用或不使用曲妥珠单抗的效果。我们证实，来那替尼在 HER2 扩增的细胞系中比 HER2 非扩增的细胞系更活跃。来那替尼（neratinib）降低 4 种 HER 受体的活化并抑制下游通路。然而，HER3 和 Akt 在 24 小时后被重新激活，而曲妥珠单抗和来那替尼的组合可以防止这种情况发生。来那替尼（neratinib）还降低获得性曲妥珠单抗耐药细胞中的 pHER2 和 pHER3。在 4 种 HER2 阳性细胞系中，来拉替尼与曲妥珠单抗联合使用比单独使用任何一种药物具有更大的生长抑制作用。此外，曲妥珠单抗与来那替尼联合使用对获得曲妥珠单抗耐药的 SKBR3 和 BT474 细胞以及 BT474 异种移植模型具有生长抑制作用。天然抗曲妥珠单抗的细胞系对来那替尼表现出敏感性，但与单独的来那替尼相比，该组合并未增强反应。HER2 和磷酸化 HER2 水平与对来那替尼的敏感性直接相关。我们的数据表明，来那替尼是一种有效的抗 HER2 疗法，可以抵消 HER2 阳性乳腺癌的先天性和获得性曲妥珠单抗耐药性。

　　我们的研究结果表明，在敏感和获得性耐药 HER2 过表达 SKBR3 和 BT474 乳腺癌细胞中，曲妥珠单抗和来那替尼联合治疗在降低细胞活力方面比单独使用曲妥珠单抗更有效。在未经曲妥珠单抗治疗的 SKBR3 和 BT474 细胞中，急性来那替尼治疗抑制了 EGFR、HER2、HER3 和 HER4 以及下游途径 ERK 和 Akt 的磷酸化，反映了其对所有 HER 受体的酪氨酸激酶活性的直接抑制作用。相比之下，曲妥珠单抗没有降低 EGFR、HER2、HER4 和 ERK 的磷酸化，反映了药物的不同作用机制。异种移植实验还表明，联合治疗导致 pHER2 的最大降低，同时 pAkt 和 pERK 的激活降低，在异种移植模型中，与单一药物相比，疗效增加相关。尽管曲妥珠单抗先前已被证明可下调 HER2 ，在我们的异种移植研究中，无论是曲妥珠单抗、来那替尼还是联合治疗，都没有看到这种效果。这可能是因为异种移植肿瘤区域之间的 HER2 染色存在显着异质性，并且本研究中使用的曲妥珠单抗剂量低于先前报道的异种移植实验，这可能会影响 HER2 下调的量和评估。

　　临床上，对不再有反应的患者停用曲妥珠单抗治疗存在争议，部分原因是继续使用曲妥珠单抗治疗的成本。我们的数据显示，与继续曲妥珠单抗治疗相比，从曲妥珠单抗耐药细胞系中撤出曲妥珠单抗导致细胞计数显着增加。此外，即使在存在曲妥珠单抗耐药的情况下，曲妥珠单抗和来那替尼的组合也比单独的来那替尼更有效。最近的数据支持了这一点，这些数据表明，尽管先前基于曲妥珠单抗的治疗出现疾病进展，但与单独使用拉帕替尼相比，拉帕替尼联合曲妥珠单抗显着改善了总生存期和无进展生存期。

　　来那替尼（neratinib）在几项临床试验中显示出有希望的活性，特别是在 HER2 阳性乳腺癌患者中。来那替尼（neratinib）和曲妥珠单抗联合紫杉醇化疗在接受过大量抗 HER2 药物和化疗的患者中显示出临床益处，平均 4 次先前的治疗方案。一项针对 HER2 阳性局部晚期乳腺癌 (NSABP FB-7) 女性的新辅助治疗的一项 II 期多中心随机研究目前正在进行中，该研究将来那替尼联合每周一次的紫杉醇联合或不联合曲妥珠单抗、阿霉素和环磷酰胺 (AC) 作为新辅助治疗。除来那替尼外，其他不可逆 TKI 包括达克替尼（PF-00299804）和阿法替尼（BIBW2992）也正在临床试验中进行测试。阿法替尼单药治疗在经过广泛预处理的 HER2 阳性乳腺癌患者中显示出有希望的临床活性，这些患者在曲妥珠单抗治疗后出现进展。

　　先前已经表明，EGFR 和 HER2 抑制剂未能抑制 HER3 磷酸化，因为 HER3 通过 ADAM17 通过 Akt 反馈回路进行配体依赖性激活。这可能是EGFR和HER2抑制剂的重要耐药机制。我们发现，虽然来那替尼有效抑制所有 HER 受体的磷酸化长达 24 小时，但 HER3 和 Akt 的重新激活在 3 天内发生。然而，与单独的来那替尼相比，曲妥珠单抗和来那替尼的组合显着延迟了 HER3 和 Akt 的再激活。相比之下，最近的一项研究表明，曲妥珠单抗和拉帕替尼或曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的双重抑制并不能完全消除 HER3 功能。有趣的是，确定用来那替尼观察到的 HER3 的再激活是否也由 ADAM17 介导的调蛋白释放诱导。可以使用 ADAM17 抑制剂或针对 HER3 的单克隆抗体来研究这种可能性。

　　像拉帕替尼，来那替尼（neratinib）可以克服获得性曲妥珠单抗耐药的细胞系模型中的曲妥珠单抗耐药，并且可以增强曲妥珠单抗敏感细胞系对曲妥珠单抗的反应。然而，来那替尼在一些先天对拉帕替尼耐药的细胞系中也显示出活性，这表明来拉替尼可能对对曲妥珠单抗和/或拉帕替尼无反应的患者具有临床益处。挑战将是确定预测标志物，以选择那些可能受益于来那替尼治疗但不能受益于曲妥珠单抗或拉帕替尼的 HER2 阳性乳腺癌患者。该研究的结果为在接受曲妥珠单抗和/或拉帕替尼治疗后疾病进展的患者中进行来那替尼联合曲妥珠单抗和单独来那替尼（联合化疗）的临床试验提供了合理的依据。

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