TFV和TAF的保护作用情况

　　为了比较TFV和TAF的保护作用，进行了研究以确保与每个ARV孵育后，极化子宫内膜（EM）上皮细胞中存在相当浓度的TFV-DP。这些研究是基于以下认识而进行的：TAF在临床上以比TFV更低的剂量给药，并且TAF在细胞内转化为TFV-DP的效率比TFV22高得多。用不同剂量的TFV或TAF处理EM上皮细胞24小时，并测定细胞内TFV-DP水平7。使用该数据作为标准曲线，然后我们计算了将导致同等量的细胞内TFV-DP的TFV和TAF剂量，以比较两种药物。

　　所示，并在别处介绍，我们为每个ARV预先确定了可产生相同细胞内TFV-DP浓度的剂量。用3种浓度（33、328和3277μM）和TAF（0.1、1和10μM）的TFV孵育，产生等量的细胞内TFV-DP。根据我们先前的出版物7,24和最初的临床试验（CAPRISA 004）选择暴露24小时，该研究报告说，在性交之前24小时在阴道内局部应用TFV的妇女，对HIV的获得具有明显的保护作用15,39。此处介绍的发现为以下各节中的比较提供了基础，这些节衡量释放到分泌物中的ARV的有效性，以保护其靶细胞免受HIV感染。

　　根据我们在中的发现，选择了TFV（3277μM）和TAF（10μμM）的浓度来评估预装的极化子宫内膜上皮细胞是否以保护HIV的方式释放它们的产物。与TFV或TAF孵育24分钟后，进行大量洗涤以去除过量的ARV，然后在新鲜培养基中再孵育上皮细胞24小时，然后再恢复顶端和基底外侧条件培养基（CM）。该CM应包含上皮细胞释放的任何TFV或TAF。为了测试上皮细胞释放的TFV是否具有保护作用，按照方法中的详细说明，在体外HIV感染之前，将活化的血液CD4+T细胞与顶端或基底外侧CM孵育24分钟。在一个代表性实验中，来自TFV和TAF的基底外侧CM处理了极化的上皮细胞，但不是顶端CM显着抑制了CD4+T细胞的HIV感染。如图1c所示，当对10例患者进行评估时，我们发现在TFV或TAF上皮预负荷后，基底外侧分泌的CM可以抵抗HIV感染（平均抑制率分别为60％和80％）。在所有这些实验中，顶端分泌物均未显示保护作用。

　　为了确定基底外侧分泌物的保护作用是否持续超过24小时，每天收集CM并每天更换新鲜培养基3天。如图2a所示，TFV和TAF在基底外侧分泌物中的保护作用持续了3天，因为它们分别赋予了针对HIV感染CD4 + T细胞的部分保护作用。到第3天，相对于培养基对照的保护作用已低于第1天的保护作用。尽管有所下降，但在4/4实验中观察到了HIV对活化的CD4+T细胞感染的显着抑制作用。 HIV保护的这种逐步下降与上皮细胞中细胞内TFV-DP水平的缓慢下降相关。

　　有趣的是，将TFV和TAF处理的上皮细胞的CD4 + T细胞相对于TFV-DP水平抑制百分比的数据结合起来，得出一条平滑的曲线，显示出50％的抑制，相当于TFV-DP浓度约为340,000 fmol /百万单元。上皮细胞TFV-DP水平与HIV对CD4 + T细胞的保护之间的这种相关关系支持了我们的假说，即保护是由于TFV和TAF的基底外侧释放到上皮细胞的基底外侧分泌物中。在这些实验过程中，在任何时候都没有明显的根尖CM受到ARV的保护，这表明EC释放的TFV对上皮下（组织）区室具有选择性。那么taf哪能买到？价格是多少？需要购买可添加下方微信。