人巨细胞病毒(HCMV)主要即早(IE)蛋白IEP86(IE2(579aa))和IEP72(IE1(491aa))可以转录激活多种简单启动子,这些启动子包含TATA元件和一个上游转录因子结合位点。在我们以前的研究中,转录激活被证明与IEP86与TATA-box结合蛋白(TBP)和与上游结合的转录因子的结合相关。
IEP72通常协同影响IEP86的激活作用,尽管以前尚未显示它可以与IEP86结合的IEP86,TBP或转录因子(例如Sp1和Tef-1)在体外直接相互作用。我们报告的生化和遗传证据表明,主要的IE蛋白可能执行与构成TFIID的TBP相关因子(TAFs)相似的功能。与该模型一致,我们发现主要的IE蛋白与许多TAF相互作用。
在体外,IEP86与果蝇TAF(II)110(dTAF(II)110)和人TAF(II)130(hTAF(II)130)结合,而IEP72与dTAF(II)40,dTAF(II)110和hTAF(II)130。已经确定了主要IE蛋白上介导结合的区域。此外,我们的数据表明,IEP72和IEP86都可以同时与hTAF(II)130结合,这表明该TAF可以为转录激活和协同作用提供两种蛋白之间的架桥作用。
一致地,IEP72的转录激活突变体不能参与桥接。这些数据表明IEP72和IEP86均与TFIID共纯化,并与衍生自感染细胞核的纯化TFIID共免疫沉淀,从而证实了这些体外相互作用是相关的。为了进一步支持IE蛋白的TAF样功能,我们发现从完整的主要IE基因表达的IE蛋白以及较小程度的IEP86可以挽救TAF中温度敏感(ts)的转录缺陷( II)250在BHK-21细胞系ts13中。对主要IE区域的突变分析表明,IEP86对抢救至关重要,而IEP72增强了其作用,影响TAF相互作用的突变在抢救中使人衰弱。我们的数据表明IE蛋白可以与TFIID结合并挽救TAF(II)250中的ts转录缺陷,支持IE蛋白作为TFIID的成分执行类似TAF的功能的模型。所以还是比较推荐TAF的购买,那么现在taf哪能买到?价格是多少?详情可咨询下方微信。
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