进行了简短的方法验证,以确保改编自人血浆的方法在猫血清中可重现。空白猫血清在分析物的保留时间没有信号。校准曲线(n=11个非零浓度)呈线性,r>0.99,每个浓度的精度在标称值的10%以内。质控(QC)样品的准确度在标称值的15%以内,校准品和QC样品的精密度在10%以内。在50 ng/mL(NHC和莫洛匹韦/莫诺拉韦)和1000 ng/mL(NHC)下进行了单次冻融循环,并证明了NHC和莫洛匹韦/莫诺拉韦(与乙腈结合时)在猫血清中的稳定性,计算浓度在5%或原始浓度范围内。
动物试验中莫洛匹韦(Molnupiravir)/莫诺拉韦的药代动力学
根据治疗前和治疗后的全血细胞计数(CBC)和血清生化检查,我们没有发现任何猫发生莫洛匹韦/莫诺拉韦相关急性器官毒性的证据。然而,所有三只接受莫洛匹韦/莫诺拉韦治疗的猫在口服莫洛匹韦(10mg/kg)后都表现出不同的恶心迹象,包括唾液分泌过多和/或呕吐。Cat 20-024在给药后1.5小时表现出唾液分泌过多,在2小时有少量呕吐物,并维持唾液分泌过多直到给药后3小时,此时猫恢复食欲。Cat 20-025在给药后1.5至2小时之间表现出舔嘴唇,并且在给药后约6小时才缺乏食欲。Cat 20-031在给药后1小时出现唾液分泌过多,并在莫洛匹韦/莫诺拉韦给药后5.5小时恢复食欲。
在给药后12小时内,在所有三只猫的血清中以低水平检测到莫洛匹韦/莫诺拉韦前药,而在给药后12至24小时以更高的浓度检测到NHC代谢物。检测到的NHC水平在个体猫之间存在显着差异(对于猫20-024,NHC和莫洛匹韦/莫诺拉韦的峰值检测水平发生在3小时时间点,NHC检测到的水平比莫洛匹韦/莫诺拉韦高10倍。对于Cat 20-031,峰值检测水平出现在1.5小时时间点,莫洛匹韦/莫诺拉韦比NHC低近100倍。猫20-025的峰值检测水平出现在9小时时间点,NHC检测到的莫洛匹韦近100倍。在24小时内,除了猫20-031之外,NHC的检测更加一致和可量化,在给药后12小时后不再检测到NHC(基于检测限)。然而,莫洛匹韦/莫诺拉韦在早期时间点和12小时时间点之后都没有一致地检测到。
对于口服10mg/kg的莫洛匹韦/莫诺拉韦,NHC代谢物的PK参数显示平均血浆C.max790纳克/毫升(3.05微米;SD±1006)在相应的最大浓度平均时间(T.max)4.3小时,平均AUC值为1779.7小时*纳克/毫升(6.87μM*h).在所有三只猫中,血清暴露水平高于NHC EC50(黑色I为0.05μM,相当于12.9ng/mL)在24小时时间段的早期,在一只猫中下降到大约EC的水平50到12小时时间点。
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