卡马替尼(Capmatinib)的获得性耐药

　　扩增的间充质-上皮转化因子MET是一种受体酪氨酸激酶 (RTK)，已被认为是非小细胞肺癌 (NSCLC) 的药物靶点。尽管针对MET驱动的 NSCLC正在积极开发多种 MET 酪氨酸激酶抑制剂 (TKI)，但对 MET-TKI 的获得性耐药机制尚未得到很好的阐明。为了了解耐药机制并建立治疗策略，我们使用MET扩增的NSCLC 细胞系 EBC-1开发了体外模型。我们建立了抗卡马替尼（Capmatinib）的 NSCLC 细胞系，并使用 3' mRNA 测序和人磷酸化 RTK 阵列确定了替代信号通路。通过定量聚合酶链反应和细胞增殖试验评估拷贝数改变；在亲本细胞系 EBC-1 和抗性细胞系之间比较 RTK 和下游效应子的激活。

　　结果

　　我们发现 EBC-CR1 表现出表皮生长因子受体 (EGFR) 依赖性生长和对阿法替尼（一种不可逆的 EGFR TKI）的敏感性。过度表达 EGFR-MET 异二聚体的 EBC-CR2 细胞对卡马替尼与阿法替尼的联合治疗反应显着。此外，源自 EBC-CR1 细胞的 EBC-CR3 细胞通过扩增的磷酸肌醇 3 激酶催化亚基 α (PIK3CA) 激活 EGFR，对阿法替尼与磷酸肌醇 3-激酶 α (PI3Kα) 抑制剂 BYL719 的组合敏感。

　　结论

　　我们的体外研究表明，EGFR 信号传导的激活和/或下游效应子（如PIK3CA）的遗传改变是卡马替尼（Capmatinib）耐药 NSCLC 细胞系使用的替代耐药机制。此外，与 MET、EGFR 和 PI3Kα 抑制剂联合治疗可能是对卡马替尼耐药的 NSCLC 患者的有效治疗策略。

　　在这项研究中，我们观察到 EGFR mRNA 过表达，但不存在EGFR激活突变或扩增，如上所述。这些发现表明，对卡马替尼（Capmatinib）的常见耐药性是通过激活 MET 激酶之外的信号通路发生的，而不是通过特定基因的遗传改变。此外，EGFR 信号的部分或完全参与是对卡马替尼的一种耐药机制，这表明在 MET 依赖性癌细胞中是一种优选的替代信号通路。

　　先前的临床研究报告了 NSCLC 患者中的从头MET扩增。根据临床前和临床发现，MET扩增可能是 MET-TKI的药物靶点。因此，已经报道了针对几种癌症的 MET-TKI 的临床前和临床试验。目前处于临床试验阶段的 Capmatinib 是一种针对 MET 依赖性癌症的非常有选择性和有效的 MET 特异性药物。然而，对 MET-TKI 的获得性耐药的快速发展一直是疗效的关键限制。尽管如此，到目前为止，只有少数 MET-TKI 的耐药机制被阐明。因此，通过分子研究确定 MET-TKI 耐药的潜在机制并建立有效的治疗策略来管理获得性耐药非常重要。尽管体内模型很重要，但体外癌细胞系可以提供有价值的模型系统来研究耐药机制。在这里，我们使用这种体外策略来鉴定卡马替尼在MET扩增的NSCLC 细胞系中的分子耐药机制。

　　总之，我们的研究结果表明，单个细胞系可以在MET扩增的NSCLC 细胞系中发展出几种类型的 EGFR 依赖性机制对 MET-TKI 的耐药性。一种机制涉及配体和受体表达的增加。事实上，我们发现EGFR和HBEGFmRNA 表达或 MET-EGFR 异二聚体形成增加，这导致 EBC-CR2 细胞对联合治疗的敏感性，作为促进获得性耐药的机制。最有趣的发现是卡马替尼治疗通过PIK3CA扩增导致从卡马替尼耐药转变为阿法替尼耐药。

　　由于癌症在临床环境中对 MET-TKI 产生耐药性，因此了解临床前和临床研究中的 TKI 耐药机制非常重要。因此，我们的研究结果强调了 MET、EGFR 和其他改变的癌基因（如PIK3CA）在卡马替尼（Capmatinib）耐药 NSCLC 细胞中涉及激酶抑制剂的治疗策略中的关系。

　　未来的努力应该通过体内模型以及来自MET扩增的 NSCLC 的临床数据来证明耐药机制，这些 NSCLC 获得了对卡马替尼的耐药性。微信扫描下方二维码了解更多：