阿法替尼afatinib在胶质母细胞瘤患者中的效果作用良好

　　尽管采取了包括手术、放疗和 TMZ（替莫唑胺）在内的积极治疗干预措施，但 GBM（胶质母细胞瘤）患者的生存率并没有显着提高。大多数 GBM 患者会出现与普遍死亡相关的复发，这表明迫切需要了解这种疾病并开发新的疗法来提高患者的生存率。最近的高通量数据分析揭示了 GBM 的遗传、表观遗传和突变特征，为个性化医疗铺平了道路。许多研究已经确定 EGFR 和突变的 EGFRvIII 在大多数 GBM 患者中被扩增/过表达，因此是重要的治疗靶点。虽然成功针对其他癌症的 EGFR 策略已在 GBM 中进行了测试，但这些临床试验在很大程度上令人失望，可能是由于其他 EGFR 家族成员和 RTK的代偿性激活。磷酸酶和张力蛋白同源物 (PTEN)，一种 PI3K 信号传导的负调节剂，也已被证明会影响 EGFR 靶向治疗结果。所以就会使用阿法替尼（afatinib）进行后续疗效监督。

　　GBM SP/CSCs 通过 HER2 和 HER3 的代偿性上调显示对抗 EGFR 疗法的抗性。有趣的是，添加拉帕替尼（抑制 EGFR 和 HER2）降低了 SP/CSCs。因此，需要针对并发信号通路的新疗法来改善 GBM 患者的预后。与这一概念一致，最近显示厄洛替尼和 HGF 清除抗体 L2G7 的组合在 EGFRvIII/cMET+/HGF+/PTEN-/-胶质瘤模型中与单一药物相比显着降低肿瘤生长并改善 OS。在此，我们研究了阿法替尼和 TMZ 组合在体外和体内过表达 EGFRvIII 的 GBM 模型中的功效。我们的研究表明，这些药物一起通过在体外诱导表达 EGFRvIII 的 GBM 细胞的G2 /M 停滞和衰老来抑制增殖、锚定依赖性和非依赖性生长。此外，阿法替尼与 TMZ 协同抑制侵袭和运动，可能是通过抑制表达 EGFRvIII 的 GBM 细胞中的 JAK2/STAT3 和 FAK 信号传导。这种组合还抑制了 cMET 的交叉激活并减少了 GBM SP/CSC。值得注意的是，我们的研究表明，在原位颅内模型中，阿法替尼和 TMZ 一起不仅可以降低肿瘤负荷，还可以抑制肿瘤生长。

　　GBM 具有高度侵袭性，经常浸润/侵入周围正常脑组织，阻碍完全手术切除并导致进展。先前已经证明，EGFRvIII 信号传导可以激活 JAK2/STAT3 信号传导，并且用 JAK2 抑制剂或 siRNA 抑制 JAK2 可降低体外和体内 EGFRvIII 细胞的侵袭性。表明 JAK2 信号传导在具有 EGFR 激活突变的肺癌细胞中对厄洛替尼产生获得性耐药中起重要作用。我们的研究显示阿法替尼完全抑制 EGFRvIII 介导的 JAK2 信号传导。重要的是，与厄洛替尼相比，阿法替尼显示出对 EGFRvIII 信号传导的长期抑制，这表明阿法替尼在预防 JAK2 介导的致瘤信号传导方面具有卓越的功效。除了 JAK2 激活，EGFR 介导的 FAK 磷酸化 (Y925) 和激活也促进癌细胞的迁移和侵袭。与这些结果一致，我们的研究表明 U87EGFRvIII 细胞比 U87 细胞具有升高的 pFAK (Y925) 水平和更大的侵袭潜力。值得注意的是，阿法替尼治疗完全消除了 EGFRvIII 介导的 FAK (Y925) 激活/磷酸化、GBM 细胞迁移和侵袭。

　　癌症干细胞通过对 CRT 的内在和获得性抗性参与肿瘤进展。包括 EGFR 在内的许多信号通路都参与了 CSC 的维持。最近，EGFRvIII 被证明可以交叉激活 cMET RTK并丰富 GBM CSC。使用乳腺癌细胞系 MDA-MB-453 和 GBM 细胞系 U-373，用 cMET 受体配体肝细胞生长因子/分散因子处理显示可赋予对阿霉素/阿霉素和顺铂的抗性。此外，siRNA 或药理学抑制剂 SU11274 对 cMET 的抑制减少了体外几种 GBM CSC 中的肿瘤球形成。此外，脂质体结合的 cMET siRNA 还降低了原位小鼠模型中 GBM 肿瘤的生长。与这些结果和我们之前在头颈部鳞状细胞癌中的结果一致，我们观察到使用阿法替尼可显着减少 CSC。在这里，我们最终确定阿法替尼通过消除 EGFRvIII-cMET 信号传导来减少 CSC。

　　最近的一项研究表明，cMET 抑制剂克唑替尼与厄洛替尼的组合显着降低了人类 GBM 异种移植物的干细胞标志物表达、神经球生长和体内肿瘤生长。虽然这种组合减少了皮下异种移植肿瘤的生长，但克唑替尼通过 BBB 的非渗透性限制了脑肿瘤临床前和临床模型中的疗效。研究表明，BBB 不仅限制了克唑替尼，而且限制了大多数化疗药物对脑肿瘤的可用性，并限制了它们的治疗效果。然而，最近一项针对 NSCLC 和软脑膜癌病患者的前瞻性多中心研究显示阿法替尼具有显着益处，尽管只有 2.45 ± 2.91% 的阿法替尼从血液中渗透到 CSF。我们的研究表明，单独使用阿法替尼对 U87EGFRvIII 直立移植小鼠的肿瘤生长和存活没有影响。

　　疗效降低可能是由于我们研究中使用的阿法替尼剂量较低，而非 NSCLC 脑转移模型中使用的较高剂量导致肿瘤消退。尽管 TMZ 在该模型中减少了生长和总体肿瘤负荷，但 60% (4/7) 的动物经历了肿瘤再生长，表明其作为单一疗法的局限性。相比之下，阿法替尼和 TMZ 一起显着降低了肿瘤生长并完全阻止了肿瘤再生长的发展 (5/5)。几项研究表明，化疗药物会杀死大部分分化的肿瘤细胞，但会富集 SP/CSC，导致肿瘤再生长。我们的结果与这些报告一致，因为 EGFRvIII 肿瘤异种移植物在 TMZ 治疗后显示 CSC 标志物显着上调，但在阿法替尼和 TMZ 联合治疗的小鼠中这些标志物显着下调。更多详情可咨询下方微信。