哌柏西利/帕博西尼作为滑膜肉瘤患者的潜在治疗方法

　　在滑膜肉瘤中，细胞周期蛋白 D1-CDK4/6-Rb 轴发生了改变。此外，β-连环蛋白（一种细胞周期蛋白 D1 调节剂）经常过度表达。此外，研究表明 t(X;18) 易位部分通过细胞周期蛋白 D1 激活影响肿瘤行为。我们研究了 cyclin D1-CDK4/6-Rb 轴的变化如何影响预后，并研究了用 CDK4/6 抑制剂哌柏西利/帕博西尼靶向该轴的效果。

　　方法

　　对滑膜肉瘤样本 (n= 43) 进行 β-连环蛋白、细胞周期蛋白 D1、p16、p21、p27、Rb 和磷酸化 Rb 的免疫组织化学染色。进行荧光原位杂交 (FISH) 以检测CCND1扩增或易位。在 4 个滑膜肉瘤细胞系中，使用细胞活力测定研究了对 palbociclib 的敏感性，并通过蛋白质水平和细胞周期停滞评估了对敏感细胞系的影响。

　　结果

　　患者样本中核磷酸化 Rb 和核 β-连环蛋白的表达与较差的存活率相关。FISH 显示CCND1在一部分肿瘤中出现零星易位。在 1 个细胞系中发现了8 倍CCND1扩增，但在所研究的患者样本中未发现。Palbociclib 有效抑制 3 个细胞系中的 Rb 磷酸化，导致 G1 期阻滞和增殖阻滞。

　　结论

　　在该系列中，核磷酸化 Rb 和核 β-连环蛋白表达是阴性预后因素。体外数据表明，哌柏西利/帕博西尼可能是滑膜肉瘤患者子集的潜在治疗方法。联合治疗是否可以增强这种效果值得进一步的临床前研究。

　　哌柏西利/帕博西尼是一种耐受性良好的药物，与来曲唑联合用于治疗患有 ER 阳性、HER2 阴性晚期乳腺癌的绝经后妇女作为转移性疾病的初始治疗，在患者中具有显着的无进展生存期 (PFS) 益处。24名 STS 患者也接受了哌柏西利检测。一项针对高分化和去分化脂肪肉瘤患者的 II 期研究显示，29 名可评估患者中有 1 名出现部分缓解，中位 PFS 为 18 周。尽管细胞周期蛋白 D1-CDK4/6-Rb 轴被认为在 SyS 中发挥作用，但到目前为止，还没有研究报告抑制该轴在 SyS 中的作用。在这里，我们使用患者肿瘤样本和 4 个 SyS 细胞系来评估CCND1的遗传改变以及可能在该轴的失调中发挥作用的蛋白质的表达模式。我们展示了 SyS 细胞系中的CCND1扩增和一部分患者样本中一小部分细胞中的CCND1重排，尽管可能的融合伙伴以及这些重排在一小部分肿瘤细胞中的意义仍然难以捉摸。尽管经常报道 cyclin D1 是 SyS 中几个可能激活的通路的下游靶点，可能由其融合基因诱导，但关于 cyclin D1 易位的确切工作机制仍然未知。我们显示核 β- 连环蛋白表达与 SyS 患者的总体存活率之间存在显着关系，这与先前的研究一致。我们提供了有关 β-catenin 表达的不同定位的信息;然而，由于只有核表达对细胞周期蛋白 D1 有影响，我们使用这种定位来进行预后评估。此外，我们表明磷酸化 Rb 的核表达与总体存活率相关。这可能是一个新的潜在预后指标，需要在更大的队列中进一步验证。

　　基于推测参与 SyS 中失调的 cyclin D1 活性，我们在 4 个 SyS 细胞系中使用了该轴的强效抑制剂哌柏西利。有趣的是，先前的研究表明，哌柏西利在许多非滑膜软组织肉瘤细胞系中的活性要低得多（IC50值为 8.95–26.63 μM），这表明异常的 cyclin D1-CDK4/6-Rb 轴是特异性的软组织肉瘤 SyS 亚型的特征。一个 Sys 细胞系具有明显更高的 IC50(CME-1)，可能用 SV40 大 T 抗原的永生化来解释。这与 p53 结合并影响 p53 转录活性。SV40 大 T 抗原也影响 Rb 活性，这导致绕过 G1/S 检查点，从而导致细胞周期的组成性激活。

　　由于哌柏西利/帕博西尼不会导致 100% 的 G1 期阻滞，因此需要联合治疗来诱导效果，因此可能会转化为临床上更高的活性。可以研究许多潜在的联合疗法，包括各种化学治疗剂、小分子抑制剂和靶向抗体等。最近，一项关于易位和 Wnt 途径的新见解被建立，一项研究报告称易位诱导了部分 Wnt 表达特征在没有 Wnt 配体的情况下，使用 β-连环蛋白作为转录去阻遏物。通过这些功能性研究，对病理生理学的了解得到了改善，这将有望产生基于基本原理的联合治疗。

　　总之，本研究广泛概述了 SyS 中 cyclin D1-CDK4/6-Rb 轴的活性，其中CCND1的遗传失调是罕见的。需要进一步研究来检查该轴和 β- 连环蛋白之间的潜在信号传导机制，因为这不是我们研究的主题。核磷酸化 Rb 和 β-连环蛋白表达与 SyS 患者的总生存期呈负相关，这具有潜在的预后作用，但应在单独的数据集中进行验证。哌柏西利/帕博西尼诱导细胞周期停滞，同时 SyS 细胞系中的磷酸化 Rb 减少，使哌柏西利成为 SyS 患者的潜在治疗选择。联合治疗是否可以增强这种效果值得进一步的临床前研究。微信扫描下方二维码了解更多：