普纳替尼/帕纳替尼增强MRP7过表达细胞的抗癌药物敏感性

　　获得性多药耐药 (MDR) 的存在是化疗成功的主要障碍之一。MDR 通常是 ATP 结合盒 (ABC) 转运蛋白过度表达的结果，这些转运蛋白与治疗药物的挤出有关。最近，研究表明几种 ABC 转运蛋白可以通过特定的酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 进行调节。普纳替尼/帕纳替尼是一种多靶点 TKI，以非常高的效力和广泛的特异性抑制 BCR-ABL 的活性，包括对其他 TKI 产生耐药性的 T315I 突变。据报道，普纳替尼能够逆转乳腺癌耐药蛋白 (BCRP) 和 P-糖蛋白 (P-gp) 介导的 MDR。在本研究中，我们首次报道普纳替尼还增强了广泛使用的 MRP7 治疗底物的细胞毒性，如紫杉醇、多西他赛、长春新碱和长春碱。普纳替尼显着增强 [3H]-紫杉醇在表达 MRP7 的细胞中。此外，[3H]-紫杉醇的积累是通过抑制MRP7介导的转运来实现的。普纳替尼通过多种机制通过 MRP7 限制药物出口。除了抑制泵功能外，普纳替尼还以时间和浓度依赖性方式下调 MRP7 蛋白表达。因此，普纳替尼可能代表一种潜在的 MDR 治疗逆转剂，并可能在临床实践中用于 MDR 癌症患者的联合治疗。

　　ABC 转运蛋白的表达和功能增加是癌细胞的共同特征，并且通常是化学抗性的基础。因此，表达异常高水平 ABC 转运蛋白的癌细胞的持续存在与预后不良有关。ABC 泵是一个有吸引力的治疗靶点，多项临床前和临床研究表明，药物流出抑制剂使癌细胞对化疗敏感 。然而，ABC 转运蛋白抑制剂的临床使用受到不可接受的副作用、药物相互作用或对长期安全性的担忧的限制。新型 BCR-ABL 抑制剂普纳替尼/帕纳替尼的吸引人的特点是其毒性通常是轻微的。常见的副作用是皮疹、皮肤干燥、腹痛、头痛和便秘，所有这些都见于约 40% 的患者，据报道大多数病例是轻微的。已发现普纳替尼可增加 BCRP 和 P-gp 底物在 BCRP 和 P-gp 过表达细胞中的细胞毒性 。

　　在本研究中，我们发现普纳替尼/帕纳替尼是 MRP7 介导的 MDR 的有效逆转剂。在临床可达到的浓度下，它可以增加表达 MRP7 的细胞对化学治疗剂的细胞毒性反应，包括紫杉醇、多西他赛、长春新碱和长春碱。与细胞毒性结果一致，药物蓄积研究还表明，ponatinib以浓度依赖性方式显着增加了 MRP7 过表达细胞中[3 H]-紫杉醇的细胞内蓄积。外排数据表明，这增加了 [3H]-紫杉醇在短时间内（4 小时）是由直接抑制 MRP7 转运功能引起的，因为普纳替尼引起的 MRP7 蛋白下调仅在孵育 16 小时后发生。这些发现表明，强效 BCR-ABL 抑制剂波纳替尼可以通过在短时间内抑制 MRP7 的功能以及在较长时间孵育后下调蛋白质表达来逆转 MRP7 介导的 MDR。

　　MRP7蛋白调控的分子机制仍需进一步研究。我们的 RT-PCR 数据显示MRP7mRNA 水平没有随着蛋白质下调而降低，这表明蛋白质调节发生在转录后水平。蛋白质降解和易位可以通过进一步的研究来考虑和证实。牛等报道低分子量肝素 (LMWH) 通过泛素-蛋白酶体途径降低 BCRP 蛋白表达来防止肺 SP 细胞的化学抗性，因为蛋白酶体抑制剂 MG132 恢复了 ABCG2 蛋白表达，而溶酶体抑制剂亮肽素和胃酶抑素 A 则没有。此外，还表明钙黄绿素在细胞内积累的显着增强能够诱导 P-gp 的下调。PI3k/Akt 和 NF-κB 是参与调节 ABC 转运蛋白表达的常见途径。PAPP-A 通过 PI3K/Akt 信号通路降低 THP-1 巨噬细胞衍生泡沫细胞中 ABCA1 和 ABCG1 的表达。由于通过 NF-κB 通路降低 P-gp 表达，硼替佐米以浓度依赖性方式逆转白血病细胞 MDR 。

　　MRP7 表达在许多癌症中与分期和预后相关。与正常肺组织相比，非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的 MRP7 表达水平上调，并且较高的表达与腺癌的晚期病理分级和 TNM 分期相关。Oguri等人发现 MRP7 可影响体内组织对紫杉烷类的敏感性，可用作 NSCLC 对紫杉醇耐药的预测标志物。在肝细胞癌中也观察到了类似的现象。与正常的相邻健康肝脏样本相比，MRP7 表达水平也升高。这些发现表明，MRP7 表达可能是某些癌症治疗反应的生物标志物或调节剂，而 MRP7 表达和功能的调节可能在癌症治疗中具有临床价值。

　　总之，我们在此首次表明，普纳替尼/帕纳替尼抑制 MRP7 功能并下调 MRP7 蛋白表达，从而促进所选化学治疗剂的细胞内积累并增加其细胞毒性。显然，还需要更多的机制研究和动物研究，值得探索普纳替尼是否可以增加体内抗癌治疗药物的细胞毒性。普纳替尼在MDR癌症患者中的临床应用可能具有巨大潜力。微信扫描下方二维码了解更多：