厄达替尼erdafitinib增加了ABCB1过表达细胞中化疗药物的敏感性

　　MTT法测定厄达替尼（erdafitinib）的细胞毒性。选择了非细胞毒性浓度（低于 IC20值）、0.06、0.2 和 0.6 μM 的厄达替尼并应用于以下实验。测试了几种 ABCB1 底物药物（包括长春新碱和紫杉醇）的细胞毒性，无论是否与 0.06、0.2 和 0.6 μM 的厄达替尼共同治疗。作为 ABCB1 的抑制剂，维拉帕米用作阳性对照。顺铂不是 ABCB1 的底物药物，用作阴性对照。与 KB-3-1 细胞相比，ABCB1 过表达的 KB-C2 细胞表现出更大的耐药倍数，分别是对紫杉醇和长春新碱的 171.5 倍和 128.0 倍。

　　厄达替尼以浓度依赖性方式使耐药细胞对紫杉醇和长春新碱显着敏感。更重要的是，在相同浓度下，厄达替尼比维拉帕米表现出更强的致敏作用。厄达替尼(0.6 μM) 可致敏 KB-C2 细胞，其逆转作用与 3 μM 的维拉帕米相似。同时，在 ABCB1 转染的细胞中评估了厄达替尼的逆转作用。厄达替尼对 ABCB1 转染的 HEK293/ABCB1 细胞显示出相似的致敏作用，0.6 μM 厄达替尼可以完全逆转对紫杉醇和长春新碱的耐药性。

　　此外，我们还评估了 厄达替尼是否可以逆转 ABCG2 介导的 MDR。米托蒽醌是 ABCG2 的底物，用作阳性对照。顺铂不是 ABCG2 的底物，用作阴性对照。厄达替尼未能逆转 NCI-H460/MX20 细胞中由 ABCG2 介导的 MDR。这一结果表明，厄达替尼特异性地逆转了由 ABCB1 介导的 MDR。

　　先前的研究报道，逆转效应的机制包括下调表达或改变 ABCB1 的细胞定位和抑制 ABCB1 外排活性。为了探索潜在的机制，进行了蛋白质印迹和免疫荧光。蛋白质印迹分析显示，在 0.6 μM 时，厄达替尼在 72 小时治疗期后未改变 ABCB1 表达。此外，免疫荧光染色显示，在 0.6 μM 时，厄达替尼不会改变 ABCB1 转运蛋白的细胞定位。这些结果表明，厄达替尼既不修饰 ABCB1 的表达，也不修饰 ABCB1 的定位。更多详情可咨询下方微信。