帕博西尼/哌柏西利作为恶性脑肿瘤患者放射治疗的辅助剂

　　放射治疗是原发性恶性脑肿瘤最常用的术后治疗方法。因此，研究化疗联合放疗治疗恶性脑肿瘤的疗效具有很高的临床意义。在这项研究中，我们检查了细胞周期蛋白依赖性激酶 4/6 抑制剂帕博西尼/哌柏西利，当它与放射线联合用于治疗人类非典型畸胎样横纹肌样瘤 (ATRT) 以及胶质母细胞瘤 (GBM) 时。

　　方法

　　体外治疗抗肿瘤活性的评估基于细胞增殖试验、克隆形成试验、流式细胞术和用于 DNA 双链断裂修复的免疫细胞化学的结果。体内治疗抗肿瘤活性的解释是基于生物发光成像、动物受试者生存分析和肿瘤切片染色的增殖和凋亡标志物。

　　结果

　　对于每个检查的视网膜母细胞瘤蛋白 (RB) 熟练的肿瘤模型（2 个 ATRT 和 2 个 GBM），一种或多种联合治疗方案在动物受试者生存获益方面显着优于两种单一疗法（P < .05）。在联合治疗方案中，同时进行帕博西尼和放射治疗以及放疗后的 palbociclib 治疗始终优于放疗后帕博西尼治疗的顺序。体外研究表明，帕博西尼与放射同时使用，以及在放射后使用帕博西尼，可抑制 DNA 双链断裂修复并促进肿瘤细胞凋亡增加。

　　结论

　　我们的结果支持进一步研究和可能的临床转化帕博西尼/哌柏西利作为保留 RB 表达的恶性脑肿瘤患者放射治疗的辅助剂。

　　ATRT 在遗传上由INI1/hSNF5肿瘤抑制基因的双等位基因失活定义。在其功能中，INI1/hSNF5对调节CDKN2A的表达至关重要。编码 p16的功能性CDKN2A的存在对INI1肿瘤抑制活性很重要，也是INI1的主要后果遗传失活是降低 p16 表达，这反过来会导致 CDK4/6 活性增加，从而促进 RB 蛋白的磷酸化和失活。因此，正如之前其他研究帕博西尼对培养的横纹肌瘤细胞系活性的人所建议的那样，在这些肿瘤中靶向活化的 CDK4/6，是合乎逻辑的，并且可以证明对治疗横纹肌瘤患者有效。

　　帕博西尼/哌柏西利抑制活性需要肿瘤 RB 蛋白表达，本研究中使用的 5 个肿瘤模型中有 4 个（BT12、BT16、GBM34 和 GBM43）表达 RB，并被帕博西尼治疗抑制。GS2 不表达 RB 蛋白。GS2 细胞以及衍生的异种移植物对帕博西尼无反应。除了对 RB 表达的要求之外，被认为是肿瘤对帕博西尼反应程度和持续时间的潜在决定因素的其他因素包括 RB-proficient 肿瘤中 p16、CDK4 和 CDK6 的表达水平以及其他细胞周期的表达细胞周期蛋白 E 和 p27KIP1 和 D 型细胞周期蛋白。这些因素——以及其他尚未确定的因素——可能导致 帕博西尼对此处研究的 RB 阳性肿瘤的反应程度不同，例如帕博西尼处理的 BT12 和 BT16 细胞的磷酸化 RB 恢复的对比结果。

　　在目前的研究中，我们扩展了先前报道的横纹肌瘤细胞对帕博西尼/哌柏西利敏感性的观察结果，表明颅内 ATRT 异种移植物，无论是缺乏还是表达低水平的 p16，都对口服帕博西尼有反应，这表明肿瘤生长几乎完全停滞。为期 2 周的动物受试者治疗疗程。在本研究中，我们还发现 palbociclib 治疗延长了由肿瘤细胞照射引起的未修复 DNA 双链断裂的时间。这可能导致联合治疗颅内异种移植物中肿瘤细胞死亡增加。最近报道了用帕博西尼和 MEK 抑制剂曲美替尼共同治疗的 KRAS 突变非小细胞肺癌的延迟 DNA 双链断裂修复。我们的研究结果以及其他人的研究结果表明，帕博西尼抑制双链断裂的非同源末端连接修复。帕博西尼对双链断裂修复的抑制作用在照射期间和照射后用帕博西尼处理的肿瘤细胞中最为明显。放疗前使用帕博西尼，但放疗期间不使用，对肿瘤细胞双链断裂修复几乎没有影响。

　　对于本研究中使用的 2 个 ATRT 模型，大多数联合治疗结果表明生存益处超过了基于单药治疗生存益处的添加量。这对于同时给予帕博西尼和放射治疗以及放射治疗后给予帕博西尼的结果尤为明显。尽管颅内 GBM34 和 GBM43 小鼠联合治疗的生存获益在所有情况下都超过了单药治疗的获益，但颅内 GBM 小鼠的生存获益超出了单个单一治疗获益总和的预期，但其中一种情况除外。对于颅内 GBM34 的小鼠，单独辐射的生存获益略高于辐射 + 帕博西尼。

　　最近的一项研究表明，帕博西尼/哌柏西利对发生黑色素瘤的基因工程小鼠的造血祖细胞具有辐射保护作用。这种保护作用是在不影响基因工程小鼠对自发肿瘤的辐射功效的情况下观察到的。同样，我们对接受帕博西尼和 RT 联合治疗的小鼠颅内肿瘤的分析显示周围脑组织中没有细胞死亡。因此，这些结果支持联合帕博西尼和 RT 对肿瘤具有高治疗指数。总之，我们的观察结果支持帕博西尼在 p16 缺乏的脑肿瘤放疗后用作辅助治疗时的临床评估。这可能被证明对治疗患有脑肿瘤的幼儿特别有价值。

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