为了研究对第二代ALK抑制剂产生耐药性的癌症是否仍然对持续的ALK抑制敏感，我们检测了第三代ALK抑制剂lorlatinib (中文名劳拉替尼)的活性。Lorlatinib(劳拉替尼)是一种有效的高选择性ALK/ROS1抑制剂，目前正在进行2期临床试验(NCT01970865)。我们首先改造Ba/F3细胞，使其表达野生型EML4-ALK (E13;A20)或携带各种ALK突变的EML4-ALK。Ba/F3细胞用克唑替尼、色瑞替尼、阿来替尼、布加替尼和劳拉替尼处理。
值得注意的是，lorlatinib(劳拉替尼)是唯一一种能够有效抑制所有ALK继发性突变的ALK抑制剂，包括ALK G1202R (IC50为49.9 nM)。接下来，基于我们对一部分患者的复合ALK耐药突变的观察，我们还评估了各种ALK抑制剂对复合ALK耐药突变的活性。我们发现克唑替尼、色瑞替尼、阿来替尼和布加替尼对D1203N+E1210K和F1174C+D1203N均无活性。相反，lorlatinib(劳拉替尼)对ALK双突变体D1203N+E1210K具有显著的效力，对D1203N+ F1174C具有中等效力。
为了进一步检查lorlatinib(劳拉替尼)在alk耐药模型中的活性，我们接下来评估了一系列ceritinib耐药的患者来源细胞系(N=6)。3个细胞系携带ALK抗性突变(MGH021-5A、MGH051-2C和MGH084-1D)， 3个细胞系(MGH034-2A、MGH049-1A和MGH075-2E)携带ALK次生突变为野生型。值得注意的是，alectinib和ceritinib对所有患者来源的细胞系的细胞生长影响最小(GI50值分别为131 nM至>10.000 nM和115 nM至>10.000 nM;图7.S6A-B)。相比之下，劳拉替尼显著抑制了3/6例患者来源的细胞系的细胞生长。
有趣的是，这种活性仅限于具有ALK抗性突变的细胞系(MGH021-5A, MGH051-2C, MGH084-1D)。其余3个缺乏ALK抗性突变的细胞系(MGH034-2A、MGH049-1A和MGH075-2E)对lorlatinib不敏感(GI50值> 10000 nM)。这些数据表明，在对第二代ALK抑制剂获得性耐药的情况下，ALK耐药突变的存在表明对ALK信号的持续依赖以及对泛抑制性ALK抑制剂lorlatinib的易感性。相反，第二代ALK抑制剂治疗失败后未发生ALK耐药突变可能表明患者不再依赖ALK并对劳拉替尼耐药。更多劳拉替尼信息可扫描下方二维码咨询：
