瑞戈非尼(regorafenib)在肺动脉高压中的治疗潜力

　　肺动脉高压 (PH) 的特征是平均动脉压逐渐升高，随后右心室衰竭和死亡。先前的研究表明，许多受体酪氨酸激酶信号传导抑制剂对 PH 的治疗可能有益或有害。在这里，我们研究了多激酶抑制剂瑞戈非尼 (regorafenib) 治疗 PH 的治疗潜力。使用 PamStation®进行基于肽的激酶活性测定12个平台。在肺动脉平滑肌细胞 (PASMC) 中使用了 5-溴-2'-脱氧尿苷增殖和 transwell 迁移测定。瑞戈非尼分别用于野百合碱和缺氧诱导的大鼠和小鼠 PH。通过血流动力学和超声心动图测量分析功能参数。激酶活性测定揭示了特发性 PAH (IPAH) 患者 PASMC 中 29 种激酶的上调，其中 15 种被确定为瑞戈非尼的潜在靶点。与对照 PASMC 相比，瑞戈非尼在 IPAH-PASMC 中显示出强烈的抗增殖和抗迁移作用。两种实验模型都表明，瑞戈非尼治疗后心脏功能得到改善，肺血管重构减少。在野百合碱 (MCT) 大鼠的肺中，瑞戈非尼 (regorafenib) 降低了 c-Jun N 端激酶和细胞外信号调节激酶 1/2 的磷酸化。总体而言，我们的数据表明瑞戈非尼在实验性 PH 中发挥着有益的作用。

　　使用基于肽的激酶活性测定平台，我们确定了几种激酶的活性，如酪氨酸激酶 (TK) 和丝氨酸/苏氨酸激酶 (STK) 在 PAH-PASMC 中显着增强。有趣的是，在 PAH-PASMC 中激活的激酶中有一半以上被多激酶抑制剂瑞戈非尼治疗所抑制。此外，我们证明了瑞戈非尼对来自供体个体和 IPAH 患者的人类 PASMC 表现出强烈的抗增殖和抗迁移作用，对患病的 PASMC 产生更强的作用。这些发现与建立瑞戈非尼作为治疗缺氧和非缺氧诱导的 PH 的治疗化合物的数据相关。

　　多项证据表明，许多信号通路在 PH 中失调，通常是由各种 TK 和 STK 的激活驱动的。以前的报告中显示，这些激酶与小分子酪氨酸或多激酶抑制剂（TKI或MKIs）的靶向提供在实验临床前模型PH和临床研究功能改善。TKI 伊马替尼（Abl、试剂盒、PDGFR-β 拮抗剂）在实验性 PH 中表现出功能改善。其他 TKI，如以表皮生长因子受体 (EGFR) 为靶点的厄洛替尼、吉非替尼、拉帕替尼，在实验性 PH 中显示出对心脏功能和血管重塑的有益作用。在临床前 PH 模型中研究的 MKI 索拉非尼或舒尼替尼提供了改善的血流动力学和重塑 。尽管在实验性 PH 中，各种 TKI 和 MKI 对疾病进展表现出有益的影响，但据推测，大范围的抑制和缺乏特异性会在各种器官中引起意想不到的毒性。

　　虽然在临床研究中伊马替尼改善了晚期 PAH 患者的血流动力学参数，提供了积极的反应，但由于一些不良副作用，如呕吐，该药物未被批准用于 PAH 治疗，外周水肿和硬膜下血肿。使用索拉非尼在晚期 PAH 患者中进行的安全性和耐受性的临床研究对心脏功能产生了负面影响，而对一小群难治性 PAH 患者进行的临床研究显示出可耐受的副作用并改善血流动力学功能，尽管很少有患者停止使用该研究由于不良副作用。这就提出了一个问题，即像瑞戈非尼 (regorafenib) 这样的 PH 定制 TKI 是否可能代表一种新的、有希望的 PH 治疗方法。

　　在这项研究中，基于肽的筛选揭示了与供体 PASMC 相比，IPAH-PASMC 中 TKs 和 STKs 的激活与我们小组之前的报告不一致。瑞戈非尼是一种口服多靶点酪氨酸激酶抑制剂，可抑制血管生成和致癌受体酪氨酸激酶，以及癌症中的 RAF/MEK/ERK 信号通路 。通过 PamGene 分析，在来自 IPAH 患者的人 PASMC 中用瑞戈非尼治疗显示出大量的激酶抑制模式。有趣的是，在 IPAH-PASMC 激活的 29 种激酶中，瑞戈非尼治疗抑制了 15 种激酶。其中，几个丝裂原活化蛋白激酶（MAPK），包括胞外信号调节激酶（ERK1和ERK2），Jun N-末端激酶（JNK1，JNK2和JNK3）, 和 p38 delta据报道有助于 PAH 病理生理学。此外，细胞周期调节激酶，其在疾病进展中起关键作用的regorafenib介导的抑制，作为检查点激酶1（Chk1的），细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK1和CDK2）被注意到。有趣的是，许多这些激酶，包括死亡相关蛋白激酶3（DAPK3）。在PH上下文先前调查，而这些激酶的靶向实验PH设置在心肺功能的有利影响。极光 B 激酶 (AurB) 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，对细胞周期调节和有丝分裂很重要。它在各种肿瘤，包括乳腺癌，结肠直肠癌，肾癌，前列腺癌，非小细胞肺癌，KRAS引起的肺癌中高度表达，并且靶向AurB激酶显示癌症进展抑制。此外，在 PAH-PASMC 中抑制生长因子如叉头盒 M1 (FOXM1) 和 polo 样激酶 1 (PLK1) 显示出细胞周期成分 AurB 的显着减少，表明靶向 AurB 激酶可能对治疗 PH 有益。抑制蛋白激酶 N1 (PKN1) 在颈动脉球囊损伤 (BI) 模型中显示出对主动脉血管平滑肌细胞和血管重塑的抗增殖和抗迁移作用。脾相关酪氨酸激酶 (SYK) 抑制剂 (BAY61-3606) 治疗降低了血管平滑肌细胞中生长因子诱导的增殖和迁移。研究表明，人类 B 淋巴细胞激酶 (BLK) 的活性形式是一种原癌基因，使用抑制剂靶向它在皮肤 T 细胞淋巴瘤 (CTCL) 中显示出抗增殖作用。这些研究表明 AurB、PKN1、BLK 和 SYK 激酶具有促增殖和促迁移特征，这是 PH 发病机制的标志。进一步研究这些激酶在 PH 中的直接作用将是有趣的。

　　总而言之，我们的数据表明，多激酶抑制剂瑞戈非尼 (regorafenib) 虽然有很大的预防措施，但可以被视为一种新的治疗选择或作为预先存在的 PH/PAH 药物的潜在佐剂。微信扫描下方二维码了解更多：