瑞格非尼/瑞戈非尼在儿童恶性肿瘤模型中的抗肿瘤活性

　　多激酶抑制剂瑞戈非尼 (瑞格非尼) 在成人实体恶性肿瘤中发挥抗血管生成和抗肿瘤生成活性，主要是晚期结直肠癌和胃肠道间质瘤。我们打算在临床前探索瑞戈非尼（瑞格非尼）单独和与抗癌药物联合治疗儿童实体恶性肿瘤的潜力，以指导儿童发展计划。针对儿童癌症创新疗法 (ITCC) 小组的 33 种实体瘤细胞系筛选了对细胞增殖的体外影响，这些细胞系涵盖了五种儿童实体恶性肿瘤。瑞戈非尼抑制细胞增殖的平均半数最大生长抑制为 12.5 μmol/L（范围 0.7 μmol/L 至 28 μmol/L）。体内, 瑞戈非尼单独以 10 或 30 mg/kg/d 或与放疗、伊立替康或丝裂原活化蛋白激酶激酶 (MEK) 抑制剂瑞戈非尼联合对各种肿瘤类型进行评估，包括具有扩增血小板的患者源性脑肿瘤模型衍生生长因子受体 A(PDGFRA)基因。单独使用瑞戈非尼可显着抑制源自神经系统和结缔组织肿瘤的所有异种移植物中的肿瘤生长。当瑞戈非尼与辐射和伊立替康联合使用时，观察到对PDGFRA 的作用增强分别扩增 IGRG93 神经胶质瘤和 IGRM57 髓母细胞瘤，导致 100% 的肿瘤消退。抗肿瘤活性与肿瘤血管化减少、PDGFR 信号传导抑制和凋亡细胞死亡的诱导有关。我们的工作表明，瑞戈非尼通过抑制血管生成和诱导细胞凋亡，在广泛的临床前儿科模型中表现出显着的抗肿瘤活性。此外，在PDGFR扩增的肿瘤中使用 DNA 损伤剂观察到放射和化学增敏作用。

　　瑞戈非尼先前已被证明在源自成人肿瘤的临床前模型中广泛抑制肿瘤生长。这是第一项显示瑞戈非尼单独或与标准抗癌治疗联合治疗具有显着抗肿瘤活性的研究，用于多种儿童实体恶性肿瘤。

　　在体外分析时，瑞戈非尼在来自五种不同儿科实体瘤适应症的 33 种细胞系中显示出剂量依赖性的抗增殖活性。50% 的生长抑制浓度介于 0.7 和 28 μmol/L 之间，与瑞戈非尼在成人癌（包括多种结直肠癌细胞系）的肿瘤细胞系中最常观察到的浓度相似，但高于 TT 的浓度。细胞受到抑制。瑞戈非尼对 TT 细胞的疗效可以通过其对活化的 RET 激酶致癌基因的有效抑制来解释，这是其增殖的主要驱动因素。从我们的体外根据数据，我们得出结论，瑞戈非尼不靶向激酶，当以单层形式培养时，该激酶是这些儿科实体瘤细胞系增殖的驱动因素。

　　随后，我们分析了瑞格非尼在源自结缔组织（横纹肌肉瘤、尤文肉瘤）或神经系统组织（神经母细胞瘤、神经胶质瘤、髓母细胞瘤）的多种儿科肿瘤模型中的体内抗肿瘤作用。它们来自肿瘤细胞系或患者材料，并在小鼠中皮下或原位生长。以 10 和 30 毫克/千克/天的剂量单独口服瑞戈非尼，导致小鼠的暴露量与每天 160 毫克的标签剂量下的人体暴露量相似，在所有模型中均表现出显着的抗肿瘤作用。当测试时，效果是剂量依赖性的。在大多数情况下，在 EW7 和 IGRG93 的剂量为 30 毫克/千克/天时，观察到与未治疗的对照相比肿瘤进展减慢，模型之间的反应程度不同。在 IGRM57 肿瘤中观察到部分消退，之前仅在携带突变KIT致癌基因的临床前 GIST 模型中使用瑞戈非尼观察到这些肿瘤（DZ，准备中的手稿）。突变的KIT是 GIST 癌症中肿瘤生长的主要驱动因素，并且被瑞戈非尼非常有效地抑制 。抑制致癌激酶（如突变的 RET 和 KIT）与非常有效的抗肿瘤活性之间的关联表明，瑞戈非尼也可能抑制对 IGRM57 肿瘤生长至关重要的肿瘤细胞激酶。尽管在PDGFR、RET或KIT 中未发现热点突变，但IGRM57 表现出PDGFRA基因扩增。与癌症有关的 PDGFRs 可能在该肿瘤中发挥作用，这得到了不仅有效抑制 PDGFRB 还有效抑制其信号激酶 AKT 和 ERK1/2 的支持。

　　单独使用瑞戈非尼（瑞格非尼）诱导细胞凋亡的作用虽然显着，但不太明显，导致 IGRG93 和 IGR-N91 中的细胞凋亡指数与对照相比增加了 2-3 倍，这与之前报道的相似。然而，它对 NEM14 中裂解的 caspase 3 染色阳性的细胞数量的影响是有限的。相比之下，辐照使 IGRG93 中的细胞凋亡指数增加了 17 倍，而伊立替康将 IGRM57 中的存活肿瘤面积减少至约 40%，表明这些治疗通过诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用，从而显着促进了与瑞戈非尼的组合作用。

　　尽管体外增殖试验无法确定对瑞戈非尼（瑞格非尼）特别敏感的特定儿科适应症，例如 GIST 或 RET 突变的甲状腺癌，但我们从体内结果得出结论，瑞戈非尼在多种儿科恶性肿瘤中表现出显着的抗肿瘤活性，独立于组织学肿瘤类型。这种活性主要是通过对血管生成的强烈抑制来介导的。对于神经系统患者衍生的异种移植模型，PDGFR 信号传导的抑制似乎涉及单一药剂，尤其是与 DNA 损伤剂的组合策略，这可能会在这种新化合物的进一步开发中考虑。微信扫描下方二维码了解更多：