阿帕他胺/阿帕鲁胺的体内抗肿瘤活性

　　下一代抗雄激素药物改变了去势抵抗性前列腺癌的治疗格局。正在研究它们在其他适应症中的效用，例如高危去势敏感性癌症和联合治疗。我们的目的是在Pten的表型不同的小鼠模型中分析阿帕他胺（阿帕鲁胺） 的体内抗肿瘤活性- 缺乏去势初治和去势抵抗性前列腺癌，使用早期和晚期疾病模型，并分析分子反应。我们还评估了治疗潜力并表征了联合靶向 AR/AKT 阻断剂的分子反应，并表明虽然这种方法在体外很有前景，但在体内大多无效，特别是在去势抵抗的环境中。我们的研究结果提供了在去势抵抗环境中将治疗抵抗与 STAT3 和 PIM-1 联系起来的证据，并提供了对阿帕他胺特定背景的抗肿瘤活性的见解。

　　阿帕鲁胺是一种用于治疗晚期前列腺癌 (PCa) 患者的非甾体抗雄激素药物，其显着改善促进了对其他适应症和其他药物治疗开发的评估；然而，持续性雄激素受体 (AR) 信号传导仍然存在问题。我们使用了Pten的本土小鼠模型- 缺乏 PCa 以检查 apalutamide 的上下文特异性抗肿瘤活性并分析其分子反应。总体而言，阿帕鲁胺在去势初治前列腺癌 (CNPC) 的早期和晚期模型中均显示出有效的抗肿瘤活性。通过蛋白质印迹和免疫组织化学进行的分子分析将持续存活的癌细胞与上调的 AKT 信号传导相关联。虽然 阿帕他胺在去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 的早期模型中无效，但它倾向于延长晚期 CRPC 的生存期。与 CRPC 中存活癌细胞相关的分子特征包括上调的异常 AR、磷酸化的 S6 和富含脯氨酸的 40 kDa (PRAS40) 底物。在体外观察到 pan-AKT 抑制剂 GSK690693 和阿帕鲁胺对 CNPC 和 CRPC 衍生的细胞系有很强的协同作用，并且倾向于改善 CNPC 的抗肿瘤反应，而不是 CRPC 体内的抗肿瘤反应。信号转导和转录激活因子 3 (STAT3) 的上调和小鼠 1 (PIM-1) 中的前病毒插入与联合阿帕鲁胺/GSK690693 相关。我们的研究结果表明，阿帕鲁胺可以减弱Pten缺陷型 PCa 以特定环境的方式提供，并提供可用于进一步研究的数据，并可能开发与阿帕鲁胺的其他组合。

　　尽管下一代抗雄激素疗法显着改善了患者的预后，但晚期前列腺癌最终会进展并导致患者死于该疾病，这强调了继续开发改进的治疗策略的未满足需求。此外，前列腺癌遵循一系列明确定义的状态，这些状态基于与其进展相关的各种临床特征，范围从临床局部疾病到转移性 CRPC。鉴于这个动态范围，治疗反应肯定会随着每个设置而变化，并且很可能是特定于上下文的。细胞异质性是实体癌的标志，在传统的基于细胞的临床前模型中难以重现。为了更好地评估治疗剂的功效，需要使用与人类疾病非常相似的临床前模型。我们的模型基于前列腺特异性缺失Pten和/或Trp53肿瘤抑制基因在人类前列腺癌中也发生了改变。在这些小鼠中发育的肿瘤以特定阶段的方式发展，类似于人类，并发展出疾病特异性特征，如 CRPC。

　　我们之前在小鼠Pten缺陷CNPC 模型中比较了各种抗 AR 疗法（包括阿帕鲁胺）的抗肿瘤活性。然而，在这项研究中，我们专注于阿帕鲁胺并扩大了我们的分析范围，包括在Pten的背景下对其抗肿瘤活性进行全面评估-在早期和晚期疾病环境中缺乏 CNPC 和 CRPC，以及与 AKT 抑制的联合治疗。我们还采用了几种实验方法来描述阿帕他胺疗法、AR 和前列腺癌细胞存活所必需的信号通路之间的相互作用，并确定了这些靶标是对阿帕他胺耐药的潜在原因，可以进一步研究和潜在地利用来对抗癌细胞生存。

　　我们的研究结果表明，单独的阿帕鲁胺在早期模型中有效抑制 CNPC，并在晚期疾病中延长生存期。我们之前表明，雄激素戒断通过异质激活多种代偿性生存途径来促进表型可塑性，这些途径被诱导为对强 AR 抑制的急性反应。在我们的模型中，CNPC 对阿帕鲁胺的 AR 反应不如手术去势强，因此可能不会像雄激素戒断那样激活代偿性生存途径。在早期 CRPC 模型中，我们没有看到阿帕鲁胺有任何显着的抗肿瘤活性。这一结果很可能是由于与 CNPC 相比，这些肿瘤中 AR 的依赖性较低。然而，在晚期Pten/Trp53-DKO CRPC 模型，用阿帕鲁胺治疗的小鼠仍然能够获得适度的生存益处。值得注意的是，与中石油一样，用阿帕鲁胺治疗的 CRPC 小鼠表明，在与 Ki67 阳性癌细胞相关的肿瘤区域中，p-S6 和 p-PRAS40 的表达水平也更高。已经报道了 AR 抑制后 AKT 及其靶点的上调。我们在Pten缺陷小鼠中进行的分子分析研究表明，AKT 和 STAT3 与雄激素剥夺的去势抵抗有关，尽管这些生存途径的上调在个体肿瘤中是异质的。然而，在这项研究中，尽管 p-PRAS40 的组成性表达与 AR 状态无关，但 p-S6 在也表达核 AR 的细胞区域中共表达。此外，含有无核 AR 的 KI67 阳性细胞的肿瘤区域也对 p-STAT3pY705 呈阳性。这些结果表明，独立于 AR 的广泛串扰网络正在Pten缺陷型 CRPC 中发生，并且可能部分有助于限制阿帕他胺的功效。

　　总之，我们已经使用忠实的前列腺临床前小鼠模型来评估和描述阿帕鲁胺在疾病过程的不同阶段在Pten缺陷型前列腺癌的背景下的活性。该研究还提供了可用于进一步研究与阿帕鲁胺的其他组合的效用的数据。总之，我们的研究结果表明，阿帕他胺可以以特定环境的方式减弱Pten缺陷型前列腺癌。微信扫描下方二维码了解更多：