将癌细胞对辐射的反应与用阿帕他胺apalutamide或比卡鲁胺（辐射前1天和辐射后3天，10μM）孵育4天的细胞进行比较。对在含睾酮培养基(10nM)中生长的细胞进行了相同的实验。在所有4天的孵化过程中，允许睾酮与药物一起存在。
在标准培养基下生长的22Rv1细胞显示出辐射剂量依赖性的活力降低（AlamarBlue®测定），而比卡鲁胺本身对生长动力学没有影响。相反，用阿帕他胺apalutamide孵育的细胞显示出照射后活力显着降低（p <0.001）。RD50从6.1Gy降低至4.3Gy。
在睾酮（10nM）存在下生长的22Rv1细胞也表现出辐射剂量依赖性的活力降低。与在无睾酮培养基中生长的细胞相比，细胞活力略有增加（RD506.8vs.6.1Gy）。与比卡鲁胺一起孵育不会影响照射后的活力。相反，用阿帕他胺apalutamide孵育的细胞显示活力显着降低（p <0.001）。RD50从6.8Gy降低至5.2Gy(p <0.001)。
在PC3和DU145细胞系的实验中也获得了类似的结果。比卡鲁胺对照射后细胞活力产生边际非显着影响。对于PC3细胞系，在睾酮不存在或存在的情况下，阿帕他胺apalutamide分别将RD50从12.3Gy降低至10.1Gy，从13.2Gy降低至9.7Gy（p<0.001） 。对于DU145细胞系，效果较弱；尽管如此，在睾酮不存在或存在的情况下，阿帕他胺apalutamide将RD50分别从5.83Gy降低至4.60Gy，将RD50从5.87Gy降低至4.83Gy（p <0.001）。比卡鲁胺也显着降低(p <0.01)。
进一步进行克隆形成测定以测试阿帕他胺apalutamide作为放射增敏剂的功效。随后用3、6和9Gy照射细胞系，并在照射后14天研究集落的发育。阿帕他胺apalutamide显着降低所有受辐射细胞系的克隆形成能力，其中对22Rv1细胞的影响最大(p <0.0001)。
阿帕他胺apalutamide剂量递增下的辐射剂量-反应活力曲线为了进一步研究阿帕他胺apalutamide对三种前列腺癌细胞系联合放疗疗效的最终剂量效应，我们进一步将阿帕他胺apalutamide的剂量增加至25和50μM，并获得了相关的放射剂量反应曲线。
对于22Rv1细胞系，阿帕他胺apalutamide剂量增加至50μM显着增强了组合的功效。PC3细胞系也有同样的效果。而DU145的影响较小，但仍然显着。DNA双链断裂动力学评估在辐射后30分钟、4小时和24小时监测γH2Ax核灶的形成和消退（对22Rv1和DU145细胞系4Gy，对PC3细胞系10Gy。照射后30分钟，所有细胞系均显示出γH2Ax病灶显着增加（存在和不存在抗雄激素的情况下）。斑点的强度在4小时和24小时时迅速下降。
在22Rv1癌细胞系中，与单独放疗相比，在所有抗雄激素存在下，γH2AX病灶的形成显着更高（p <0.0001）。24小时时，仅当细胞在抗雄激素存在下被照射时，才存在残余的γH2AX焦点(p <0.05)。阿帕他胺apalutamide和比卡鲁胺之间没有差异。在PC3癌细胞系中，与单独辐射和比卡鲁胺相比，在阿帕他胺apalutamide存在下，γH2AX病灶的形成显着更高（p <0.001）。与单独辐射相比，比卡鲁胺没有改变γHT2Ax动力学模式。24小时时，存在少量残余的γH2Ax病灶，然而，无论细胞接受有或没有抗雄激素的辐射，其都是相似的。
在DU145癌细胞系中，在阿帕他胺apalutamide存在的情况下，γH2Ax病灶形成较多，但这并未达到显着。在接受辐射的细胞中，接受抗雄激素治疗与未接受抗雄激素治疗的细胞在4小时和24小时时没有发现差异。详情请扫码咨询：
