microRNA对伊马替尼(imatinib)治疗效果的影响

　　胃肠道间质瘤（GIST）主要由受体酪氨酸激酶基因突变引起。尽管酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼（imatinib）显着改善了患者的预后，但伊马替尼耐药仍然是 GIST 治疗中的主要治疗挑战。在此，我们评估了 microRNA 在伊马替尼治疗的 GIST 中的临床影响。

　　方法：

　　使用微阵列和 RT-qPCR 在来自接受新辅助伊马替尼治疗的患者的 GIST 标本中量化 microRNA 的表达水平。在 GIST 细胞中评估了miR-125a-5p和 PTPN18的功能作用。通过 GIST 样品中的蛋白质印迹定量 PTPN18 表达。

　　结果：

　　我们发现miR-125a-5p和miR-107 的过表达水平与 GIST 标本中的伊马替尼耐药性相关。在功能上，miR-125a-5p表达在具有纯合KIT突变的GIST882 细胞中调节伊马替尼敏感性，但在具有双KIT突变的GIST48 细胞中没有。miR-125a-5p 的过表达抑制了 PTPN18 的表达，而 PTPN18 表达的沉默增加了伊马替尼治疗后 GIST882 细胞的细胞活力。PTPN18 蛋白水平在伊马替尼耐药的 GIST 中显着降低，并且与miR-125a-5p呈负相关。此外，一些 microRNA 与转移显着相关，KIT突变状态和存活率。

　　结论：

　　我们的研究结果强调了miR-125a-5p通过 GIST 中的 PTPN18 调节对伊马替尼（imatinib）反应的新功能作用。

　　在这项研究中，我们评估了 miRNA 失调在伊马替尼（imatinib）治疗的 GIST 中的临床影响。我们在 GIST 患者中发现了与伊马替尼耐药、转移性疾病、KIT突变状态和生存相关的特定 miRNA。

　　miR-125a-5p调节 GIST 中的伊马替尼反应

　　我们确定了与 GIST 中伊马替尼（imatinib）耐药性显着相关的 miRNA 子集。其中，我们使用 RT-qPCR 在更大的样本群中验证了miR-125a-5p，并对其在 GIST 细胞系中的作用进行了功能表征。我们显示miR-125a-5p表达调节单KIT突变的 GIST882 细胞中的伊马替尼反应性，但不调节双KIT突变的 GIST48 细胞系。鉴于两种细胞系都没有完全的遗传变化，其他遗传因素（除了KIT突变）可能有助于在两种细胞系中观察到不同的伊马替尼反应。此外，miR-125a-5p两名患有继发性KIT突变的多发肿瘤患者的敏感和耐药肿瘤之间的表达没有差异。总之，我们的数据表明 miRNA 作为GIST 中第二位点KIT突变的替代抗性机制的作用。

　　GIST 中与转移相关的 miRNA

　　我们展示了两种 miRNA（miR-301a-3p和miR-150-3p）与转移的关联。与我们在 GIST 中的结果一致，在转移性乳腺癌中发现了miR-301a-3p过表达。在功能上，已证明miR-301a-3p可促进乳腺癌细胞和肝细胞癌细胞中的细胞生长、迁移和侵袭。这些发现支持miR-301a-3p 的作用作为各种癌症类型转移进展和发展的癌基因。另一方面，人们对miR-150-3p 知之甚少。有趣的是，其上调显示在伴有肝转移的结直肠癌中。

　　具有单或双KIT突变的GIST

　　尽管大量研究表明双突变在 GIST 中赋予获得性伊马替尼（imatinib）耐药性，但我们（在本研究中）和其他人发现一部分（40-53%）对伊马替尼耐药的 GISTs 含有单个KIT突变，表明涉及替代抗性机制。此外，我们发现几个 miRNA 在具有单突变和双突变的 GIST 之间显着失调。那些差异表达的 miRNAs 可能参与 GISTs 中具有单和双KIT突变的部分不同途径。虽然Allander等人在具有不同的GIST报道均匀基因表达谱KIT突变，不同的集群也用的GIST中观察到KIT突变，提示GIST患者携带的亚组KIT突变。由于在这些研究中缺乏关于二次突变的信息，我们无法确定在基因表达谱中观察到的不同簇是否反映了KIT 中的单突变和双突变。与GIST 中的KIT突变一致，具有单一或双重CEBPA 的急性髓性白血病突变具有不同的基因表达谱和不同的临床结果。需要进一步研究以确定具有单和双KIT突变的GIST 之间的生物学和临床差异。

　　GIST 患者的预后 miRNA

　　我们将miR-1915确定为伊马替尼（imatinib）治疗下 GIST 存活的候选预后标志物。有趣的是，miR-1915 的表达也与转移和双KIT突变显着相关。最近，Niinuma等人(2012)报道了miR-196a过表达与 GIST 的高风险等级、转移和较差的存活率显着相关，而Choi等人(2010)揭示了与肿瘤风险相关的不同 miRNA 子集。调查结果的差异可能是由于样本选择所致。没有给出两项研究中的研究队列是否在新辅助基础上使用伊马替尼治疗的信息。

　　总之，我们报告了与伊马替尼（imatinib）耐药、转移、KIT突变状态和 GIST 存活相关的 miRNA 的鉴定。我们的研究结果表明，这些 miRNA 的差异表达可能有助于术前接受伊马替尼治疗的 GIST 患者的预后。重要的是，我们提供了功能性证据表明miR-125a-5p可以通过 PTPN18 调节调节单个KIT突变的 GIST 细胞中的伊马替尼反应，这表明miR-125a-5p和 PTPN18 对接受伊马替尼新辅助治疗的 GIST 患者的预后影响。微信扫描下方二维码了解更多：