曲美替尼(trametinib)可改善肾纤维化

　　在肾纤维化期间，CKD 的标志和促进剂（无论导致 CKD 的潜在肾脏疾病），即细胞外调节激酶 1/2 (ERK1/2) 途径被激活并与有害的分化和扩张有关肾成纤维细胞。ERK1/2 通路抑制剂曲美替尼（trametinib）目前用于治疗黑色素瘤，但尚未探索其在 CKD 和肾纤维化中的疗效。

　　方法

　　我们研究了曲美替尼是否在两种肾纤维化小鼠模型（遭受单侧输尿管梗阻 (UUO) 或喂食富含腺嘌呤饮食的小鼠）以及培养的原代人成纤维细胞中具有抗纤维化作用。我们还使用免疫印迹分析、免疫组织化学染色和其他工具来研究抗纤维化作用的潜在分子机制。

　　结果

　　Trametinib 显着减弱 UUO 和腺嘌呤喂养小鼠的胶原沉积和肌成纤维细胞分化和扩增。我们还发现，在受伤的肾脏中，曲美替尼抑制 ERK1/2 通路可改善哺乳动物雷帕霉素复合物 1 (mTORC1) 靶点的激活，这是另一个关键的促纤维化信号通路。Trametinib 还抑制由主要促纤维化细胞因子 TGF-β1刺激的培养的原代人肾成纤维细胞中的 ERK1/2 通路，从而抑制下游 mTORC1 通路的激活。此外，曲美替尼降低了肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白的表达和肾成纤维细胞的增殖，证实了我们的体内数据。至关重要的是，在肌成纤维细胞激活后对动物给药时，曲美替尼还显着改善了肾纤维化进展。

　　结论

　　有必要进一步研究曲美替尼（trametinib）作为治疗多种病因的慢性肾纤维化疾病的潜在候选者。

　　我们报道，临床上可用的 MEK 特异性抑制剂曲美替尼抑制 ERK1/2 通路可显着改善肾纤维化过程中的胶原沉积和肌成纤维细胞扩张。机制上，曲美替尼对 MEK-ERK1/2 的抑制也显着抑制下游 mTORC1、STAT3、Smad2/3 和 NF-κB通路的激活。对人类成纤维细胞的研究证实了我们的发现，并揭示曲美替尼抑制 TGF-β1诱导的 ERK1/2 和 mTORC1 通路激活，以及αSMA 上调和增殖。在受伤后给予动物时，曲美替尼还显着减弱肾纤维化进展和信号传导。此外，曲美替尼在 2 个月的时间里减轻了腺嘌呤喂养动物的肾脏纤维化，这是一种饮食诱导的 CKD 模型。这是第一项表明临床可用的 ERK1/2 通路抑制剂曲美替尼可以改善体内肾纤维化的研究。

　　ERK1/2在体外肾成纤维细胞分化过程中被激活，在体内肾纤维化临床前模型和患者肌成纤维细胞中均被激活。此外，ERK1/2 在 TGF-β1、EGF、血管内皮生长因子和 PDGF 受体的下游被磷酸化，所有这些都与肾纤维化的进展有不利的关系。然而，在纤维化肾脏中单独抑制 ERK1/2 是否足以预防疾病进展，之前尚未进行全面测试。

　　曲美替尼显着减少胶原沉积并显着降低αSMA 表达在阻塞的肾脏中。此外，曲美替尼改善了 TGF-β1刺激的人成纤维细胞中αSMA 的上调和增殖。波形蛋白表达通常与αSMA 一起用作肌成纤维细胞的标志物，并且已知在 UUO 期间上调，曲美替尼也显着减弱了波形蛋白的表达。

　　Trametinib在体内显着阻断 ERK1/2 活化，并且UUO肾脏中间质Ki67表达降低，可能反映了肌成纤维细胞和巨噬细胞扩增的抑制。除了间质外，在 UUO 动物的小管中检测到相当多的 ERK1/2 磷酸化。肾小管损伤可通过分泌可溶性因子直接诱导成纤维细胞活化。此外，受损的小管经历上皮-间质转化，上调波形蛋白，并促进纤维化。ERK1/2 抑制的一些有益作用可能是由于对肾小管细胞的影响。事实上，曲美替尼已被证明可减少缺血/再灌注损伤和败血症期间的肾小管损伤。除了抑制肌成纤维细胞扩张外，ERK1/2 通路抑制是否改善了 UUO 的肾小管损伤值得进一步研究。曲美替尼还减弱了 AKT 磷酸化，已知在 TGF-β1下游被激活并由 UUO 诱导。在曲美替尼治疗的动物中，AKT 抑制是适度的（约 50%），这表明这可能是由于 ERK1/2 抑制对成纤维细胞扩增和随后减少的 TGF-β1分泌的间接影响。

　　曲美替尼（trametinib）在人体中具有良好的耐受性，没有肾毒性，并且大多数副作用（皮疹和腹泻）很容易通过辅助药物治疗。重要的是，由于 80% 的曲美替尼在粪便中排泄，它可能适用于肾功能不全的患者。此外，我们发现曲美替尼的抗纤维化作用比肿瘤动物模型中使用的剂量低 30 倍，这表明较低剂量可能对 CKD 患者有益，且副作用较少。

　　与大多数常见疾病不同，CKD 患者的死亡率正在增加。对 CKD 新型治疗药物开发的需求从未如此迫切。重新利用现有的药物可以显着加速其向肾脏诊所的过渡并减轻 CKD 的健康负担。我们设想我们的工作可以指导未来的临床试验，以验证曲美替尼（trametinib）治疗肾纤维化疾病的安全性和有效性。微信扫描下方二维码了解更多：